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CFU 是菌落形成单位,CFU/g :每公克样品中含有的细菌菌落总数。
菌落形成单位(CFU、cfu、Cfu)是微生物学中使用的单位。它估计样本中存活的细菌或真菌细胞的数量,能够在受控条件下通过二元裂变繁殖。
用菌落形成单位计数需要培养微生物并仅计数活细胞,而显微镜检查则计数所有细胞,无论是活的还是死的。细胞培养物中菌落的视觉外观需要显着增长,并且在计数菌落时不确定菌落是来自一个细胞还是一组细胞。将结果表示为菌落形成单位反映了这种不确定性。
在标准大小的培养皿上,大肠杆菌的平板计数在 30 到 300 CFU 范围内呈线性关系。因此,为确保样品在此范围内产生 CFU,需要稀释样品并进行多次稀释。通常,使用十倍稀释,并且稀释系列在所选稀释范围内以 2 或 3 次重复接种。
通常铺板 100 µl,但也使用高达 1 ml 的较大量。更大的电镀量会增加干燥时间,但通常不会导致更高的准确性,因为可能需要额外的稀释步骤。
从线性范围内的板中读取 CFU/板,然后在数学上推导出原始的 CFU/g(或 CFU/mL),并考虑镀层量及其稀释因子(例如CLSI VET01S)。
这种方法的一个优点是不同的微生物种类可能会产生明显不同的菌落,无论是微观上还是宏观上。菌落形态可用于鉴定存在的微生物。
事先了解生物体的微观解剖结构可以更好地理解观察到的 CFU/mL 与每毫升活细胞数的关系。或者,在某些情况下,可以通过在进行稀释之前涡旋样品来减少每个 CFU 的平均细胞数。
用途
1、倾板法,其中样品悬浮在培养皿中,使用冷却至约 40–45 °C 的熔融琼脂(刚好高于凝固点,以最大程度地减少热诱导的细胞死亡)。营养琼脂凝固后,培养板。
2、 铺板法,其中将样品(以小体积)铺展在营养琼脂板的表面上,并在孵育之前让其干燥以进行计数。
3、膜过滤法,其中样品通过膜过滤器过滤,然后将过滤器放置在营养琼脂板的表面上(细菌面朝上)。在孵化过程中,营养物质通过过滤器浸出以支持生长的细胞。由于大多数过滤器的表面积小于标准培养皿的表面积,因此平板计数的线性范围会更小。