实验方案

一． 试剂与仪器

葛根素、二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA，苏州安利化工厂)，α-甲基丙烯酸(MAA，苏州正兴化工研究院)、偶氮二异丁腈（AIBN，分析纯，上海市四赫维化工有限公司）、丙酮（湖南汇虹试剂有限公司）、甲醇、氢氟酸(HF)（中国医药集团上海化学试剂公司），薄层层析硅胶(400目，青岛海洋化工厂)、无水乙醇（分析纯，天津市恒兴化学试剂制造有限公司）；乙腈（分析纯，天津市光复精细化工研究所）；乙酸（汕头市西陇化工厂有限公司）。

LC-20A型高效液相色谱（日本岛津公司）；IRAffinitf-1岛津傅立叶变换红外光谱仪（日本岛津公司）；FW-4A型粉末压片机（天津市拓普仪器公司）； KQ-250E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；UV-2550型紫外可见分光光度计（岛津销售公司）；TD25-WS多管架自动平衡离心机（湘仪离心机公司）；BZF-50型真空干燥箱（上海博迅实业有限公司）；GR-30型热空气消毒箱（上海博迅实业有限公司）；DF-101B集热式恒温磁力搅拌器（浙江乐清市乐成电器厂）；FA2104N型电子分析天平（上海民桥精密科学仪器限公司）；WCT-2C型差热分析仪（北京光学仪器厂）；GYS-Ⅱ型不锈钢电热恒温水浴锅（北京市医疗设备厂）；S-3400N型扫描电镜（河南贝尔伟业仪器有限公司）。

二．印迹聚合物的制备

（1）.预聚体系及引发剂溶液制备

准确称取0.416g葛根素于25mL烧杯中，加入172.3mg功能单体(MAA)充分混匀，加入1.692gEDMA，加入3mLACN，通氮除氧15min，密封后于恒温磁力搅拌器上搅拌30min，40℃振荡24h，制得预聚合物溶液。

取120mgAIBN，溶于ACN，10mL容量瓶定容，通氮除氧15 min，制得引发剂溶液备用。 (2.)分子印迹聚合物聚合

预聚合物溶液加入25mL带塞三角烧瓶，加入2.4g硅胶，充分混合至无粘连，加入1mL引发剂溶液，于水浴60℃恒温引发聚合24 h，倾入聚四氟乙烯塑料烧杯中，加入过量40%HF溶液，搅拌12 h以上，过滤，用乙酸-甲醇（1:9）混合溶液洗脱模板分子，直至紫外检测不到NIC，乙腈洗涤除去残留的乙酸和甲醇，放入真空干燥箱中干燥，备用。

非印迹聚合物的合成：方法与印迹聚合物合成方法完全一致，只是在合成时不加入模板分子。

(3) MIPs、NIPs吸附性能研究及其表征

1.. 静态吸附 ○

配制标准曲线：称取50mg葛根标准物质，置于25mL容量瓶中，加入乙腈溶液溶解，定容至刻度。分别取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、分别置于10mL容量瓶，采用0.05mol/L的NaOH溶液定容，制得0.08 mg/mL、0.16 mg/mL、0.24 mg/mL、0.32 mg/mL、0.4 mg/mL的样品。以乙腈溶液为参比液，采用紫外分光光度计进行分析，检测葛根在259 nm的吸光度。以葛根素浓度为横坐标，对吸光度为纵坐标作图，得葛根的标准曲线，得其线性回归方程。

配制0.05mg/mL的NIC乙腈标准品溶液，称取20.0mgMIP和NIP分别置于25mL溶液中，于锥形瓶中静态吸附5h，用0.45μm的微孔滤膜过滤，滤渣在70℃下烘干3h，收集备用，溶液用紫外可见分光光度计测定其中NIC的浓度，计算吸附量Q：

Q=(C0-Ce)*V/m…………………………………①

式中，C0—初始浓度(mg/mL)，Ce—平衡浓度(mg/mL)，V—溶液体积(mL)，m—MIP、NIP质量(mg)。并按公式计算印迹效率IF

……………………………………②

式中，QMIP—MIPs吸附量，QNIP—NIPs吸附量。 2 红外光谱分析 ○

采用IRAffinitf-1岛津傅立叶变换红外光谱仪，将干燥的MIPs、NIC-MIPs混合KBr压片制样，分析红外谱图。 3热重分析 ○

采用差热分析仪对MIPs和NIPs进行热重分析，分析聚合物的重量随温度的变化曲线。升温速率：10 ℃/min，记录温度：25 ℃~800 ℃，气氛：空气。

4吸附等温线 ○

取NIP、MIP各10份，每份5mg，分别加入不同浓度的葛根素乙腈溶液5mL：0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50 mg/mL，加盖密封后静置5h，离心后取上清液，用高效液相色谱分析葛根素含量。 5高效液相色谱分析 ○

在温度35℃，波长259nm，流动相6:4甲醇/0.02M磷酸盐缓冲液，进样量10μL，流速1mL/min的色谱条件下，用高效液相色谱测定葛根素平衡浓度Ce。由式①计算出平衡吸附量Q，绘制出葛根素在印迹聚合物上的等温吸附曲线（Co/Q）。 6电镜分析 ○

取少量NIP、MIP、NIC-MIPs、NIC-NIPs样品于1.5mL无菌离心管，分别加入一定量甲醇密封，于超声波清洗器中超声5分钟，各取一滴置于盖玻片上，待甲醇挥发后制样，将样品进行电镜分析。